AltairCHO^TM&VegaCHO^TM系列細胞培養基是奧浦邁全新一代的化學成分確定培養基，不含水解物、蛋白及任何動物來源的成分，尤其適合于中國倉鼠卵巢細胞（CHO-K1、CHOZN、CHO DG44和CHO-S細胞）的大規模、高密度懸浮培養，能夠穩定獲得更高的抗體/重組蛋白表達。該系列基礎培養基與奧浦邁全新開發的下一代高性能補料 VegaCHO^TM Feed/AltairCHO^TM Feed系列補料聯用，可獲得更長的細胞存活時間、更高的蛋白/抗體表達量。

細胞馴化

直接接種法

1.對于可以直接接種的細胞，可以從無血清培養基中直接接種到Vega/AltairCHO^TM培養基中，接種密度參考傳代步驟，并需要依據具體情況而定

2.繼續傳代細胞，直到細胞穩定生長

3.傳代幾代之后，細胞密度在接種的3～4天內達到達到2×10⁶ cells/mL、細胞活性≥85%。此時，可以認為細胞已被馴化成功

梯度馴化法

1.對于傳統的生長在5～10%血清或無血清的細胞，采用梯度馴化法，接種密度3×10E5～4×10E5 cells/mL

2.監測細胞生長情況，直到細胞密度達到≥3×10⁶ cells/mL

3.用Vega/AltairCHO^TM培養基：原始培養基=25:75的比例稀釋細胞。直到這個比例的培養基細胞生長良好，再進一步稀釋培養。在接下來的每次操作中，提高Vega/AltairCHO^TM培養基的比例，如25:75, 50:50, 75:25, 90:10, 100%

4.在完全使用Vega/AltairCHO^TM 培養基接種3～4天之后，活細胞計數應該至少達到2×10⁶ cells/mL，細胞活性≥85%。此時，細胞已經馴化到OPM培養基中

細胞復蘇

1.在37℃水浴中快速（＜2min）融化冷凍的細胞

2.將冷凍管中的細胞液全部轉移到125mL含有30mL預溫過的Vega/AltairCHO^TM培養基的搖瓶中

3.放入37℃，5~8%CO₂，轉速115～135rpm，濕度80%的搖床中培養

4.復蘇后，前兩個階段的細胞密度維持在0.5×10⁶～1×10⁶ cells/ml，之后，按照正常流程進行傳代或培養

細胞傳代

1.將Vega/AltairCHO^TM培養基放入37℃條件下預熱20-30min

2.取細胞密度≥1×10⁶ cells/ml、活性≥90%、處于對數生長期中期的細胞進行傳代

3.按接種密度為0.5×10⁶ cells/L和最終傳代體積，計算所需種子液量

4.無菌轉移所需量的種子液至合適體積的搖瓶中，并添加所需體積的已預熱的Vega/AltairCHO^TM培養基

5.將搖瓶放入溫度37℃，濕度80%，轉速110-150rpm（振幅50mm），5%-8% CO₂的細胞培養搖床中進行培養

6.每2～4天用新鮮的培養基按上述步驟進行傳代培養